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技術(shù)文章 / article
如何做好ATCC細(xì)胞株的污染防控工作?
原載自:m.gzspsh.com[技術(shù)資料頻道] 2026-01-15 瀏覽次數(shù):116
在細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域,ATCC細(xì)胞株堪稱關(guān)鍵資源。然而,污染問題如影隨形,嚴(yán)重威脅其質(zhì)量與實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。因此,全面做好ATCC細(xì)胞株的污染防控工作,意義非凡。
一、污染類型剖析
1.微生物污染:這是最為常見的污染類型,涵蓋細(xì)菌、真菌、支原體以及病毒等。以支原體為例,因其個(gè)體微小且無細(xì)胞壁,常規(guī)無菌過濾難以將其攔截。它們悄然潛伏在細(xì)胞培養(yǎng)體系中,不易被察覺,卻能持續(xù)破壞細(xì)胞的正常生理狀態(tài),干擾實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。
2.交叉污染:當(dāng)不同細(xì)胞系同時(shí)開展培養(yǎng)操作時(shí),若缺乏嚴(yán)格的隔離措施,就極易發(fā)生此類污染。一旦某種生長(zhǎng)特性較為強(qiáng)勢(shì)的細(xì)胞混入其他細(xì)胞群體,便會(huì)改變?cè)屑?xì)胞的生長(zhǎng)微環(huán)境,致使實(shí)驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)偏差,嚴(yán)重影響科研工作的可信度。
3.化學(xué)污染:主要源于培養(yǎng)基中的雜質(zhì)、消毒劑殘留以及塑料耗材中析出的增塑劑等。這些化學(xué)物質(zhì)即使含量甚微,也可能對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生毒性作用,抑制細(xì)胞生長(zhǎng),甚至導(dǎo)致細(xì)胞死亡,使實(shí)驗(yàn)陷入僵局。
二、全面防控措施
1.環(huán)境調(diào)控:構(gòu)建專門的細(xì)胞培養(yǎng)區(qū)域,將清潔區(qū)、操作區(qū)與培養(yǎng)區(qū)進(jìn)行明確劃分,并設(shè)置有效的物理隔離屏障。在操作區(qū),配備高效空氣過濾系統(tǒng),確保進(jìn)入操作空間的空氣潔凈無塵。定期使用紫外線對(duì)超凈臺(tái)進(jìn)行消毒處理,并在每次使用前后,用75%乙醇仔細(xì)擦拭臺(tái)面,大程度的降低環(huán)境中污染物的影響。
2.試劑與耗材管理:優(yōu)先挑選經(jīng)過嚴(yán)格認(rèn)證的供應(yīng)商,采購(gòu)質(zhì)量可靠的培養(yǎng)基、血清及各類一次性耗材。對(duì)于液體試劑,需采用0.22μm濾膜進(jìn)行過濾除菌;而對(duì)于可重復(fù)使用的玻璃器皿,則要遵循規(guī)范的清洗、干燥和高壓滅菌流程,從源頭上杜絕污染隱患。
3.規(guī)范操作流程:實(shí)驗(yàn)人員在進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室前,務(wù)必穿戴好無菌實(shí)驗(yàn)服、口罩和手套。在超凈臺(tái)內(nèi)進(jìn)行操作時(shí),應(yīng)避免不必要的交談,防止飛沫傳播污染物。針對(duì)不同類型的細(xì)胞系,必須使用獨(dú)立的器具和專用的移液器,有效避免交叉污染的發(fā)生。
4.監(jiān)測(cè)預(yù)警機(jī)制:建立常態(tài)化的監(jiān)測(cè)體系,每日借助顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)及培養(yǎng)基的狀態(tài),及時(shí)捕捉任何異常變化。每周定期取適量培養(yǎng)基樣本接種至肉湯培養(yǎng)基和瓊脂平板,通過培養(yǎng)檢測(cè)是否存在微生物污染。每隔三個(gè)月,運(yùn)用PCR技術(shù)對(duì)所有細(xì)胞系進(jìn)行全面的支原體檢測(cè);每六個(gè)月,則通過STR分型鑒定確認(rèn)細(xì)胞身份的單獨(dú)性,確保實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的精準(zhǔn)可靠。
ATCC細(xì)胞株的污染防控是一項(xiàng)涉及多環(huán)節(jié)、多層面的系統(tǒng)性工程。只有從環(huán)境的精細(xì)管理、試劑耗材的嚴(yán)格篩選、操作流程的標(biāo)準(zhǔn)化執(zhí)行到監(jiān)測(cè)預(yù)警的嚴(yán)格落實(shí),每一個(gè)環(huán)節(jié)都做到嚴(yán)謹(jǐn)細(xì)致,才能切實(shí)保障ATCC細(xì)胞株的質(zhì)量,為科學(xué)研究提供堅(jiān)實(shí)有力的支撐。



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